传统的酶切连接方法是用相同的限制性内切酶消化质粒和含有目的片段的DNA，得到具有相同的粘性末端或平末端的线性DNA（如图1），对酶切产物进行纯化后，再利用DNA 连接酶将片段连入载体，得到重组质粒，将重组质粒转入感受态细胞中，进行后续的筛选、扩增。具体实验操作步骤请参考阅读《载体构建入门攻略——克隆载体篇》...
载体构建(Vectorcon Struction)是进行分子生物学研究的常用手段之一,使用该技术将外源DNA片段插入至人工构建的质粒中,目的是把连接好的DNA分子运送到受体细胞当中进行复制扩增用于后续的科研试验。 2. 常用的载体构建方法? 目前常用的载体构建技术包括重叠延伸PCR法、传统的酶切连接法以及同源重组法等。传统的酶切连接法...